发酵蜘蛛眼可以直接在工作台的合成页面制作出来，其制作原材料一共需要三种，也就是蜘蛛眼、棕色蘑菇以及糖。其中的蜘蛛眼掉落自出没在野外随机区域的蜘蛛，将蜘蛛击杀掉之后，有百分之十五的基础概率会在原地掉下一个蜘蛛眼。也可以直接下到废弃矿井中需找到洞穴蜘蛛的刷怪笼，在此处的刷怪笼中必定出刷出四只左右的蜘蛛群。其他生物的掉落物包含蜘蛛眼的还有女巫，在刷这些敌对生物之前最好将最高级的抢夺魔咒附魔在武器上。
棕色蘑菇可以通过在特定区域手动采集到，它会自然生成亮度等级不超过十二的区域内。最常见的就是下界，操控角色穿过下界传送门就可以直达下界区域，在这里随处就可以找到生长在地面上的棕色蘑菇。其次必定生长有棕色蘑菇的地点就是蘑菇岛，在蘑菇到的地表就可以发现大片棕色蘑菇。而最后的糖同样可以在工作台中合成出来，其合成材料只有甘蔗。
进入到工作台的操作页面后，在左侧的任意空槽内放入一个甘蔗就可以自动合成出一个糖。当然也可以将蜂蜜瓶分解掉来获得糖，一个蜂蜜瓶被分解掉之后必定可以收获到三个糖。甘蔗在河边就可以找到，蜂蜜瓶可以从流浪商人那里购买到，消耗掉一个绿宝石就可以将一个蜂蜜瓶买到手。凑齐这些合成材料后就可以在工作台中制作出发酵蜘蛛眼。
